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摘要:本文詳細闡述了大豆矮桿導(dǎo)入系的外源片段剖析及基因定位研究,通過繪制圖示基因型方法分析了含有矮桿基因S的片段導(dǎo)入系,共檢測到100個導(dǎo)入片段,確定了多個與矮桿基因密切相關(guān)的位點。本研究為進一步研究大豆矮桿基因提供了重要基礎(chǔ),對大豆育種具有重要意義。引言:大豆(Glycinemax)作為重要的糧油兼用作物,在全球范圍內(nèi)廣泛種植。大豆種子富含蛋白質(zhì)和植物油,對人類飲食和健康具有重要作用。然而,傳統(tǒng)大豆品種生長周期長、植株高大,給管理和收割帶來不便。因此,培育矮桿大豆品種成為大...
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摘要本研究旨在探索電穿孔介導(dǎo)睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)基因轉(zhuǎn)染在延緩失神經(jīng)骨骼肌方面的療效。通過構(gòu)建CNTF基因轉(zhuǎn)化體系,采用某品牌電穿孔儀對SD大鼠進行基因轉(zhuǎn)染,觀察其對骨骼肌的抑制作用。實驗結(jié)果表明,電穿孔介導(dǎo)CNTF基因轉(zhuǎn)染可顯著延緩失神經(jīng)骨骼肌進程,為神經(jīng)肌肉疾病的治療提供新的策略。引言神經(jīng)營養(yǎng)因子(NTFs)作為一類具有促進和維持神經(jīng)細胞生長、存活和分化的特異性蛋白質(zhì),為神經(jīng)修復(fù)治療帶來了新的希望。睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)是NTFs中的重要成員,具有廣泛的生理...
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摘要:本研究旨在聯(lián)合運用陽離子多聚物PEI和方波電穿孔兩種不同機制的轉(zhuǎn)染手段,以期克服精子難轉(zhuǎn)染的問題。通過形成穩(wěn)定復(fù)合物、吸附細胞表面、胞吞作用進入細胞、內(nèi)涵體逃逸與DNA釋放等步驟,實現(xiàn)了對小鼠精子的高效核內(nèi)轉(zhuǎn)染,為精子載體法在大動物中的應(yīng)用提供了成功的模式。引言精子載體法是一種以精子為載體,利用精子與卵子結(jié)合的過程將外源基因帶入受精卵中形成轉(zhuǎn)基因動物的方法。該法無需專門的大型設(shè)備和技術(shù),簡單便捷,應(yīng)用廣泛,尤其對于豬、牛、羊等大動物更有方法學上的優(yōu)勢,科學界一直寄厚望于...
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摘要:本研究通過電穿孔技術(shù)將人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)轉(zhuǎn)染至許旺細胞,旨在提升其增殖能力和抗衰老性能,進而為神經(jīng)損傷修復(fù)提供新型細胞資源。實驗結(jié)果顯示,hTERT轉(zhuǎn)染顯著增強了許旺細胞的增殖能力和端粒酶活性,優(yōu)化了細胞形態(tài)。本研究為神經(jīng)損傷修復(fù)策略提供了理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。引言:神經(jīng)損傷疾病嚴重影響患者的生活質(zhì)量,尋找有效的修復(fù)策略顯得尤為關(guān)鍵。許旺細胞(又稱雪旺細胞)作為周圍神經(jīng)損傷修復(fù)中的重要細胞,具有分泌多種神經(jīng)營養(yǎng)因子、引導(dǎo)軸突生長及髓鞘化的功能。然而,許旺細胞在...
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摘要:本研究旨在建立一種高效的人外周血單核細胞分離及電穿孔轉(zhuǎn)染方法。通過基于HISTOPAQUE的密度梯度離心及抗體標記純化方法分離單核細胞,并使用某品牌電穿孔儀進行轉(zhuǎn)染。結(jié)果顯示,單核細胞純度高達89.95%,轉(zhuǎn)染效率為60%~70%。該方法為后續(xù)單核細胞功能研究提供了可靠的技術(shù)支持。引言人外周血單核細胞作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分,在感染、炎癥及免疫反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。為了深入研究單核細胞的功能及其在各種疾病中的作用機制,首先需要建立高效的單核細胞分離和轉(zhuǎn)染方法。單核細胞的...
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摘要:本研究旨在建立一種高效電穿孔介導(dǎo)siRNA轉(zhuǎn)染原代軟骨細胞的方法,以實現(xiàn)基因沉默效果并維持較高的細胞存活率。通過優(yōu)化電穿孔參數(shù)和使用高效電轉(zhuǎn)緩沖液,成功實現(xiàn)了siRNA的高效轉(zhuǎn)染,為基因功能研究和疾病機制探討提供了有力工具。引言在生命科學研究領(lǐng)域,RNA干擾(RNAi)技術(shù)已成為研究基因功能和疾病機制的重要工具。小干擾RNA(siRNA)作為RNAi的關(guān)鍵效應(yīng)分子,能夠特異性地沉默目標基因的表達。然而,由于細胞類型的多樣性和siRNA的自身特性,siRNA的轉(zhuǎn)染過程面臨...
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摘要:本文詳細探討了裸質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞的可行性,通過構(gòu)建真核載體PCDNA3.1(+)-EGFP與pEGFP-C3的綠色熒光蛋白表達系統(tǒng),驗證了裸質(zhì)粒直接轉(zhuǎn)染細胞的效率及其影響因素。實驗結(jié)果表明,真核載體可直接通過細胞膜進入細胞并表達綠色熒光,但其轉(zhuǎn)染效率與質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和濃度密切相關(guān)。本研究為基因治療及基因功能研究提供了新的思路和方法。引言基因轉(zhuǎn)染是現(xiàn)代分子生物學研究中的一項基礎(chǔ)且關(guān)鍵的技術(shù),廣泛應(yīng)用于基因表達研究、基因功能分析、蛋白質(zhì)生產(chǎn)以及疫苗開發(fā)等領(lǐng)域。傳統(tǒng)的基因轉(zhuǎn)染方法多采...
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摘要:本文旨在通過基因表達譜芯片技術(shù)篩選能被β干擾素(IFN-β)反式調(diào)節(jié)的靶基因,并研究其生物學功能及其機制。實驗構(gòu)建了IFN-β的真核表達載體,轉(zhuǎn)染HepG2細胞后,利用基因芯片技術(shù)檢測到70條差異表達基因。這些發(fā)現(xiàn)為深入探索IFN-β的調(diào)節(jié)機制及其生物學功能提供了新的依據(jù)。引言β干擾素(IFN-β)作為一種重要的細胞因子,在抗病毒、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮著重要作用。IFN-β能夠調(diào)節(jié)多種細胞的基因表達,進而影響細胞的增殖、分化和凋亡等生物學過程。然而,IFN-β的具...