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摘要為了建立穩(wěn)定表達(dá)谷胱甘肽過氧化物酶6（Glutathioneperoxidase6,GPx6）的真核表達(dá)細(xì)胞系，本研究對GPx6進(jìn)行基因克隆，構(gòu)建了慢病毒表達(dá)載體，并成功建立了表達(dá)豬源GPx6的CHO-K1細(xì)胞系。該研究成果為GPx6在豬繁殖力提高和精液稀釋液添加劑的應(yīng)用提供了新思路。引言谷胱甘肽過氧化物酶6（GPx6）作為抗氧化酶家族的重要成員，在生物體內(nèi)具有抗氧化和細(xì)胞保護(hù)的作用。近年來，GPx6在生殖健康領(lǐng)域的研究逐漸增多，尤其是在豬繁殖力提高方面展現(xiàn)出潛在的應(yīng)用價...

摘要：本研究旨在探討肝細(xì)胞生長因子（hepatocytegrowthfactor,HGF）基因通過腎臟電轉(zhuǎn)染方法對大鼠腎缺血再灌注損傷（ischemia-reperfusioninjury,IRI）的保護(hù)作用。通過構(gòu)建hHGF基因表達(dá)載體，并利用威尼德電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)將其導(dǎo)入大鼠腎臟，觀察其對腎功能、組織學(xué)改變及細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果表明，hHGF基因電轉(zhuǎn)染能有效減輕腎缺血再灌注損傷，為腎保護(hù)提供新的策略。引言腎缺血再灌注損傷是臨床腎臟移植、腎臟部分切除術(shù)及主動脈瘤手術(shù)等過程中的常見...

摘要本研究旨在探討山羊精子電穿孔轉(zhuǎn)染外源DNA的最適條件，并評估其對精子活力和轉(zhuǎn)染效率的影響。通過優(yōu)化電場強(qiáng)度、電擊時間和電擊次數(shù)等參數(shù)，確定了山羊精子電穿孔轉(zhuǎn)染外源DNA的最佳條件。實驗結(jié)果顯示，在400V、200μs條件下電擊一次，精子活力和轉(zhuǎn)染效率顯著提高，為生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因山羊奠定了基礎(chǔ)。引言基因轉(zhuǎn)移技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)的重要組成部分，尤其在動物轉(zhuǎn)基因領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。精子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移因其操作簡便、成本低廉而受到廣泛關(guān)注。其中，電穿孔法作為一種高效的物理方法，能夠通過產(chǎn)生暫...

摘要：本研究成功構(gòu)建了基于重組酶的大豆基因定點編輯系統(tǒng)，通過結(jié)合CRISPR/Cas9系統(tǒng)和重組酶技術(shù)，顯著提高了基因編輯的效率和精準(zhǔn)度。實驗結(jié)果表明，該系統(tǒng)能有效實現(xiàn)大豆基因的定點突變，并減少了脫靶效應(yīng)的發(fā)生。該系統(tǒng)為大豆遺傳改良和分子育種提供了新的技術(shù)手段，具有重要的理論和實踐意義。引言傳統(tǒng)的育種方法存在周期長、效率低的問題，且難以實現(xiàn)對特定基因的精準(zhǔn)編輯。近年來，基因編輯技術(shù)，特別是CRISPR/Cas9系統(tǒng)的出現(xiàn)，為大豆遺傳改良提供了新的途徑。然而，CRISPR/Ca...

摘要：本研究旨在探討結(jié)核DNA疫苗通過肌肉注射聯(lián)合電轉(zhuǎn)染方法在增強(qiáng)免疫反應(yīng)中的效果。我們構(gòu)建了結(jié)核DNA疫苗質(zhì)粒，并通過威尼德電轉(zhuǎn)染設(shè)備對小鼠進(jìn)行免疫接種。結(jié)果顯示，該方法顯著提高了抗體滴度和T細(xì)胞反應(yīng)。本研究為結(jié)核DNA疫苗的高效遞送提供了新的策略，具有廣闊的應(yīng)用前景。引言結(jié)核?。═B）是一種由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacteriumtuberculosis，Mtb）引起的慢性傳染病，是全球公共衛(wèi)生的重要威脅。盡管現(xiàn)有疫苗卡介苗（BCG）在一定程度上能預(yù)防兒童重癥結(jié)核病，但...

摘要本文詳細(xì)探討了使用電穿孔法將重組桿狀病毒基因組轉(zhuǎn)染至昆蟲細(xì)胞的過程。研究通過優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，比較了電穿孔法與脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法的效率，并評估了子代病毒的感染能力。結(jié)果顯示，電穿孔法具有操作簡便、周期短、成本低等優(yōu)點，為重組桿狀病毒在昆蟲細(xì)胞中的高效表達(dá)提供了新的方法，具有廣闊的應(yīng)用前景。引言桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是一種真核表達(dá)系統(tǒng)，具有高效表達(dá)目的蛋白的能力，并能對蛋白進(jìn)行修飾和加工，使其具備一定的生物學(xué)和免疫學(xué)活性。該系統(tǒng)在基因工程產(chǎn)品的生產(chǎn)中得到了廣泛應(yīng)用，尤其在昆蟲細(xì)胞中，重組桿...

摘要：本文詳細(xì)探討了電轉(zhuǎn)染技術(shù)下破損豬腎細(xì)胞的紅外光譜特性，通過構(gòu)建高效的電轉(zhuǎn)化體系，實現(xiàn)了外源基因的高效導(dǎo)入。實驗采用紅外光譜技術(shù)對細(xì)胞損傷程度及基因表達(dá)進(jìn)行了監(jiān)測，結(jié)果顯示電轉(zhuǎn)染顯著改變了細(xì)胞的紅外光譜特征，為基因治療及細(xì)胞生物學(xué)研究提供了新的思路和方法。本文還深入討論了該研究的創(chuàng)新點及應(yīng)用前景。一、引言電轉(zhuǎn)染技術(shù)作為一種高效、便捷的基因?qū)敕椒?，在基因治療、?xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。該技術(shù)通過短暫的高壓電場作用，使細(xì)胞膜發(fā)生可逆性穿孔，從而實現(xiàn)外源基因的導(dǎo)入。然而...

摘要：本研究旨在將細(xì)胞電通透技術(shù)應(yīng)用于DNA肌肉轉(zhuǎn)染，通過優(yōu)化電場強(qiáng)度、脈沖時值和質(zhì)粒劑量等參數(shù)，實現(xiàn)高效電轉(zhuǎn)染。實驗采用增強(qiáng)綠色熒光蛋白（EGFP）基因質(zhì)粒作為報告基因，注射到小鼠脛前肌后給予特定電脈沖，轉(zhuǎn)染率顯著提高。該方法為基因治療及體內(nèi)基因表達(dá)研究提供了新思路和應(yīng)用前景。引言綠色熒光蛋白（GFP）是一種來自水母的蛋白質(zhì)，具有更好的熒光性質(zhì)，能夠在特定波長光的激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。近年來，GFP被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究中，特別是在轉(zhuǎn)基因動物研究中得到了廣泛認(rèn)可。利用GFP基...